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发布时间:2020-07-03







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据介绍,该发明公开了一种非洲病毒 CP530R 基因的荧光 PCR 检测试剂及其制备方法与用途,设计合成了一套特异性的引物及 Taqman 探针和阳性对照,并利用该引物及探针建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高的荧光 PCR 检测体系,可在 3~4 小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地检出 ASFV CP530R 基因,可用于来自家猪、和软蜱的各种样本中微量非洲病毒CP530R 基因的检测。如果其他尚未被评估的原料符合以下标准就更有利于病毒存活:蛋白质含量高(特别是天然蛋白质)、猪源、相对表面积较大质量(比)、含有载体的微成分。

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非洲 ( ASF ) 是由非洲病毒 ( ASFV ) 引起猪的一种急性、热性、高度接触性传i染病。从 20 世纪 60 和 70 年代i开始 ASF 由非洲蔓延至欧美地区,2007 年格鲁吉亚、亚美尼亚、阿塞拜疆和俄罗斯都出现了大面积流行,2018年8月也开始在我国快速蔓延开来,对我国养猪业的持续稳定发展构成巨大威胁。当互补序列出现时,探针与DNA杂交,探针转变成一个开放的结构,呈线性,报告荧光基团与淬灭荧光基团彼此在空间上产生足够的分离,荧光基团脱离了淬灭基团的影响,从而产生可被检测到的荧光。因此,本方法为快速诊断非洲病毒,提供了有力的技术手段。



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一个猪场对进场人员的衣物进行熏蒸消毒,专门制作了一个消毒柜,但由于开始设计不理想,消毒柜太大,无法进入屋内,就放在了舍外。夏秋季节消毒没什么问题,但到了冬天,他们仍然在舍外熏蒸消毒,这样的效果是很差的。短距离可经空气传播、污染的饲料、泔水、剩菜及肉屑、栏舍、车辆、器具和衣服等均可间接传播本病。还有的在入舍消毒池中,只是例行把水和火碱放进去,也不搅拌,火碱靠自身溶解需要较长时间,那刚放好的消毒水的作用就不确实了。

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现有数据表明,在猪日粮中,猪流行性腹泻病毒和其他外来病毒等能很好存活的原料包括:豆粕、酒糟、猪源蛋白质、维生素预混料、氨化胆i碱、L-赖氨酸和DL-蛋氨酸。如果其他尚未被评估的原料符合以下标准就更有利于病毒存活:蛋白质含量高(特别是天然蛋白质)、猪源、相对表面积较大质量(比)、含有载体的微成分。广州劢博--食品加工企业/公司/厂核酸提取纯化生猪屠宰企业作为产业链条上的重要主体,防控动物疫病、保证产品质量安全是应尽的责任。值得注意的是,这些原料并非具有相同的污染风险。


广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、检测、非洲检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲病毒快速检测试剂盒。广州劢博--冷冻食品加工企业/公司/厂荧光定量PCR相对定量可以对每个样本中模版的其实水平之间的差异进行精i确比较,没必要知道模版的确切拷贝数,并且样本模板中的相对水平不用使用标准曲线就可以确定。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。

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猪肉制品加工企业、生猪产品经营者采购生猪产品应当批批查验其动物检疫合格证明、肉品品质检验合格证明以及非洲病毒检测结果(报告),确保购进的生猪产品不带非洲病毒;采购的进口生猪产品应附有合法的入境货物检验检疫合格证明。不得采购没有非洲病毒检测结果(报告)及未经检疫或者检疫不合格的生猪产品,确保猪肉制品和经营的生猪产品不含非洲病毒。广州劢博--生猪屠宰场PCR消毒i药在杀灭病原的同时往往自身也被破坏,一个消毒i药分子可能只能杀i死一个病原,如果一个消毒i药分子遇到五个病原,再好的消毒i药也不会有效果。

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所谓real-time Q-PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在real-time 技术的发展过程中,两个重要的发现起着关键的作用:(1)在90年代早期,Taq DNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的发现,它能降解特异性荧光记探针,因此使得间接的检测PCR产物成为可能。如果生产者认可排除猪源原料是可行的,那么还应该考虑到那些间接的猪源原料,像添加剂、基础混合物和那些可能源于猪源的动物蛋白或脂肪等。(2)此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展导致real-time Q-PCR方法在研究工作中的运用。



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